加米霉素注射液对小鼠的急性毒性试验

为评价加米霉素注射液的毒性效果,试验采用改良寇氏法对66只清洁级昆明系健康小鼠的半数致死量(LD50)进行测定,结果显示:根据改良寇氏法公式计算,加米霉素注射液LD50为1094.2 mg/kg,95％可信限范围为1000.0～1196.7 mg/kg,根据化学物急性毒性LD50剂量分级表明加米霉素注射液属于低毒性药物.下面我们来看看加米霉素注射液对小鼠的急性毒性试验。

加米霉素(　Gamithromycin)是法国梅里亚(MERIAL)开发的兽用抗生素注射剂ZACTRAN的主要有效成分，分别于2007年、2010年和2011年被欧洲药品局、加拿大保健产品与食品管理局和美国食品与药品管理局批准用于防治溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌和睡眠嗜组织菌引起的牛呼吸道疾病。单剂量皮下注射给药后，加米霉素具有吸收快、分布广，肺组织中浓度高，消除缓慢，药效持久，安全性高等优点，具有广阔的应用前景。我国已批准使用该药，但由于其剂量低，其毒性效果未见报道；为科学的评价法国进口生产的加米霉素注射液的急性毒性，本实验室进行了加米霉素注射液对小鼠皮下给药的急性毒性试验，采用改良寇氏法[1]对小鼠的半数致死量(　LD50)进行测定，以期为临床用药提供理论依据。

1、试验设计

1.1　材料

试验动物：清洁级昆明系小鼠，66只，雌、雄各半，体重28.　34±4.14　9，购于石河子大学动物试验中心；雌、雄分笼饲喂，自由采食、饮水；试验前临床健康观察7天。

供试药品：加米霉素注射液(　Garnithromycin)，商品名Zactran.　EU/2/08/082/005,　France　Merial　Lot/Ch　-8,EXP.　/verwendbar　bis:　GYM040DG　06　2018。按“l:K系列稀释法等容量配制各剂量组所需的受试药物溶液。

1.2　方法

通过反复进行预实验，以求高剂量组小鼠死亡率在100%，低剂量组在0%，确定试验小鼠0%和100%死亡的剂量范围。根据预试验所用剂量，按公式求出正式试验的剂量比。正式试验（每组10只小鼠），记录死亡率，根据改良寇氏法公式计算LD50值[6]；用药后期观察小鼠的临床状态，并将死亡小鼠进行解剖检查，观察内脏等器官的病理变化。

1.2.1预实验

将小鼠随机分成4组，每组4只，雌、雄各半，各组间按等差浓度皮下注射给药，观察死亡情况，根据死亡情况（全死或全活）相应的来提高或降低给药剂量，进行二次试验[8]，以求高剂量组死亡率在1000/，低剂量组在0%，确定试验小鼠0%和100%死亡的剂量范围。根据预试验所用剂量，按公式求出正式试验的剂量比。

1.2.2正式试验

将小鼠随机分为5组，每组10只，雌雄各半，试验前对雌雄小鼠进行编号，称重。按改良寇氏法设计组间剂量比r，确定正式试验每组药物的剂量。皮下注射给药后，试验小鼠观察7天，若给药4天后继续有死亡，则继续观察至14天，称重并记录动物外观体征、饮食、行为活动等情况及动物死亡情况，对死亡动物进行病理剖检并记录病变情况。每天记录动物的毒性反应情况和死亡分布情况。

2.计算公式:

3 结果
3.1 预备试验结果
小鼠经皮下给药加米霉素注射液后，死亡率100%的剂量为1700 mg/kg，死亡率0%的剂量为800 mg/kg。根据公式计算出r=l. 21。
3.2 正式试验结果
记录各试验组小鼠的死亡数，求出相应的剂量对数(x)，死亡数(r)，死亡率(p)，存活率(q)及pq等。详见表1。

根据公式可得：

3.3　中毒症状及死亡剖检结果

给药后约2h高剂量组部分中毒小鼠出现呼吸加快，四肢无力，运动减少．伏卧不动，之后出现抽搐，衰竭死亡，死亡高峰出现在2～12　h。中毒较轻的小鼠，呆伏少动，眼睑紧闭，24　h后陆续恢复正常采食和饮水。到第7天，存活小鼠采食、饮水正常，活动自如。剖检中毒死亡小鼠，可见部分小鼠肝脏肿大、质脆，其他器官未见眼观病理变化。

4　分析和讨论

本试验结果表明，皮下注射加米霉素注射液对小鼠的LD5o是1094.2　mg/kg，lgLD50的标准误差Sxj0为0.02，95%可信限范围为1003.　0-1196.7　mg/kg。

根据化学物急性毒性LDso剂量分级表，加米霉素注射液属于低毒性药物，临床使用安全。